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Transformación de embriones de papaya maradol (Carica papaya L.) con el gen 9/13 de la lipoxigenasa - RIIIT
Transformación de embriones de papaya maradol (Carica papaya L.) con el gen 9/13 de la lipoxigenasa
La lipoxigenasa (LOX, EC 1.13.11.12) es una dioxigenasa que contiene hierro, no heme, se encuentra presente en una diversidad de plantas y algunos procariontes; este grupo de enzimas catalizan la hidroperoxidación de ácidos grasos poliinsaturados (AGPIs). El propósito de la presente investigación fue evaluar la eficiencia de co-transformación y selección estable de embriones transformados de papaya Maradol. Embriones somáticos globulares provenientes de frutos inmaduros se co-bombardearon con una mezcla equimolar del plásmido que contenía el gen de LOX en antisentido (pCambia2301LOX) y el gen de la higromicina fosfotransferasa (pWRG15115 o pCambia1201) sobre partículas de tugsteno. Se midió la expresión transitoria de la beta-glucoronidasa sobre los embriones co-bombardeados, éstos de mantuvieron sobre medio embriogénico adicionado con 35 mg L-1 de higromicina B, subsecuentemente transferido a medio G. La expresión transitoria fue positiva a las 48 h después del bombardeo. La selección en medio embriogénico con higromicina se realizó por seis meses para producir 23 callos embriogénicos resistentes. Los callos fueron propagados y generados de embriones somáticos resistentes, posteriormente evaluados como clonas transgénicas. La transformación se evidenció mediante análisis por PCR del fragmento de 517 bp correspondiente al gen nptII presente en pCambia2301LOX, esto indica además la presencia del gen de la lipoxigenasa en antisentido en los embriones de papaya transgénicos regenerados.
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